قاعدة الرسائل الجامعية
دراسة تعدد الأنماط الجينية أحادية النوكليوتيد فى جين مقاومة العديد من الأدوية فى متلازمة الكلى الأولية وصلته بلإستجابة للإستيرويد
عنوان الرسالة : دراسة تعدد الأنماط الجينية أحادية النوكليوتيد فى جين مقاومة العديد من الأدوية فى متلازمة الكلى الأولية وصلته بلإستجابة للإستيرويد
عنوان الرسالة المترجم : Study of mdr1 single nucleotide polymorphism in primary nephrotic syndrome and its relevance to steroid response
اسم الباحث : Helal, Mai Mohamed Elghreeb
الدرجة : ماجستير
الكلية - القسم : faculty of medicine. department of pediatrics
الجامعة : جامعة بنها
التاريخ : 2018
الموضوع : الأمراض
المشرف : Elfky, Osama Abo Elftoh, Abdelhamed, Abdelhamed Abdelmonaem, Elsadk, Akram Elshafay, Mohammed, Shuzan Ali.
الرابط :

المتلازمة الكلوية الأولية هي الحالة المرضية الأكثر شيوعا في الأطفال ولكن في البالغين غالبا ما تكون ثانوية لأمراض أخرى مثل داء السكر والسرطان والأمراض الإلتهابية المزمنة.
يتميز المرض بكثرة البروتين في البول، نقص الألبيومين فى الدم، ارتفاع نسبة الدهون في الدم وخاصة الكوليستيرول، وتورم بالجسم بالإضافة إلى أعراض أخرى.
وينقسم الأطفال الذين يعانون من المتلازمة الكلوية حسب استجابتهم للعلاج بالإستيرويد إلى أطفال يستجيبون للعلاج بالإستيرويد وأطفال لا يستجيبون للعلاج بالإستيرويد، وجد أن معظم الأطفال الذين لا يستجيبون للعلاج بالإستيرويد غالبا ما تتطور الحالة إلى المرحلة الأخيرة وهى الفشل الكلوى لذلك فمن الضروري تحديد العوامل المختلفة التي تسهم في العلاج المثبط للمناعة من أجل تحسين علاج المتلازمة الكلوية الأولية. 
ووجد أن التغير في مستوى أو وظيفة جليكو بروتين ب أو كليهما يعد من الآليات الممكنة لمقاومة العلاج وهذا البروتين هو نتاج جين (مقاومة العديد من الأدوية) وهو مضخة خروج نشطة عبر الغشاء لمجموعة متنوعة من السموم والعديد من الأدوية ويتم نقل جلوكوكورتيكوستيرويد بما في ذلك بريدنيزون أيضا بواسطة جليكو بروتين ب.
أظهرت بعض الدراسات الحديثة أن التعبير الجينى ونشاط جليكو بروتين ب قد يتأثر بتعدد الأنماط الجينيه لجين مقاومة العديد من الأدوية ويعتبر من أهم هذه التعددات النمطية الجينيه أحادية النيكليوتيد هو T3435C وهو موضوع دراستنا .وقد وجد أن تعبير الحمض النووى الريبوزى الرسول لجين مقاومة العديد من الأدوية في الخلايا الليمفاوية يرتبط سلبيا مع الأستجابة للبريدنيزون ,السيكلوفوسفاميد والسيكلوسبوري فى أطفال المتلازمة الكلوية. 
الهدف من الدراسة : 
الهدف من الدراسة هو تقييم دور تعدد الأنماط الجينية لجين مقاومة العديد من الأدوية فى الأطفال الذين يعانون من المتلازمة الكلوية الأولية وعلاقة هذا التعدد الجينى باستجابة المرضى للعلاج بالإستيرويد وهل ممكن استخدامه كعلامة للتنبؤ لإستجابة المرضى.
المرضى وطرق الدراسة
تصميم الدراسة:
 مكان الدراسة: قسم أمراض كلى الأطفال بمستشفى بنها الجامعي. 
 تشمل الدراسة ثلاث مجموعات على النحو التالي: 
المجموعة الأولى: تشمل (40) طفلاً من أطفال المتلازمة الكلوية الأولية ذات الإستجابة الأولية للإستيرويد (المستجيبين).
المجموعة الثانية: تشمل (20) طفلاً من أطفال المتلازمه الكلوية الأولية ذات المقاومة الأولية للعلاج بالإستيرويد (غير مستجيبين).
المجموعة الثالثة:تشمل (20) طفلاً من نفس العمر والنوع ومن نفس المنطقة الجغرافية كمجموعة ضابطة .
معاير الأدراج:
•المرضى المصابين بالمتلازمة الكلوية الأولية.
•عمر المرضى من 1 الى 15 سنة.
•أدراج كلا النوعين الذكور والإناث.
معاير الاستبعاد:
•مرضى المتلازمة الكلوية الثانوية.
•عمر المرضى أقل من 1 سنة أو أكثر من 15 سنة
•الأمراض المزمنة الأخري. 
•العلاج بالاستيرويد لغير مرضى المتلازمة الكلوية الأولية
•السرطان
أساليب الدراسة:
خضع كل مجموعات المرضى للآتي:
التاريخ المرضى الكامل مع التركيز على
•أعراض التورم الشامل (التورم حول العين يمتد ليصل إلى الأطراف السفلية, كيس الصفن, العصعص وجدار البطن الأمامى,......الخ).
•أعراض المضاعفات مثل نقص حجم الدم ,العدوى, تجلط الدم, سوء التغذية والتأخر فى النمو.
الفحص الأكلينكي الشامل مع التركيز على :
•ضغط الدم, معدل التنفس وفحص البطن الشامل.
الفحوص المعملية: 
•تحليل بول 
•مجموع مستويات البروتين فى عينات البول 24 ساعة
•نسبة الالبيومين فى المصل
•وظائف الكلى يوريا والكرياتينين
•نسبة الألبيومين / الكريات فى البول 
•صورة دم كاملة
•نسبة الصوديوم والبوتاسيوم فى المصل
الفحوص الأخرى:
•أشعة تليفزيونية على البطن والحوض
•تحليل الباثولوجى لعينة الكلى إن وجد
كل الفحوصات السابقة تم أخذها من سجلات المرضى.
•تحديد النمط الجينى لتعدد الانماط الجينية أحادية النيوكليوتيد لجين مقاومة العديد من الأدوية (1045642rs T 3435C) بواسطة تفاعل البلمرة المتسلسل على ثلاث مراحل : استخراج الحمض النووي- التضخيم لتفاعل البلمرة المستمر- التحليل الآليلى.
أخذ العينات:
•تم الحصول على عينة 2 مل من الدم الوريدى من كل طفل
•تم وضعها فى أنبوبة EDETA لتفاعل البلمرة المتسلسل الخاص بجين المقاوم للعديد من الأدوية
•تم ذلك بعد أخذ موافقة مسبقاً من آباء الأطفال قبل مشاركتهم في الدراسة.
التحليل الإحصائى :
تم تنظيم البيانات التي تم جمعها وتويبها وتحليلها إحصائياً بإستخدام الأساليب الإحصائية المناسبة .
النتائـــج:
•لا يوجد اختلاف بين المرضى والأصحاء من حيث النوع والسن.
•لا يوجد إختلاف بين مجموعات المرضى (المستجيبين للإستيرويد والغير مستجيبين للإستيرويد) من حيث سن ظهور المرض ووجود تاريخ مرضى عائلي.
•وجد أن الأطفال الذين يستجيبون للعلاج بالإستيرويد أعمارهم أقل من الأطفال الذين لا يستجيبون للعلاج بالإستيرويد.
•لا يوجد اختلاف بين الأطفال الذين يستجيبون للعلاج بالإستيرويد والأطفال الذين لا يستجيبون للعلاج بالإستيرويد من حيث الفحوصات المعملية التالية (نسبة الكوليسترول في الدم -نسبة اليوريا والكرياتينين في الدم- تحليل البول ويشمل وجود ألبيومين أو صديد أو دم بالبول( .
•يوجد اختلاف بين الأطفال الذين يستجيبون للعلاج بالاستيرويد والأطفال الذين لا يستجيبون للعلاج بالاستيرويد من حيث الفحوصات المعملية التالية (نسبة الألبيومين في الدم أعلى في الأطفال المستجيبين - نسبة الهيموجلوبين في الدم أعلى في الأطفال المستجيبين- زلال في البول فى 24 ساعة أعلى فى الأطفال الغير مستجيبين(.
•من حيث النمط الجينى وجد أن النمط الجينى لتعدد الأنماط الجينيه أحادية النيوكليوتيد لجين مقاومة العديد من الأدوية (T3435C) أكثر حدوثا في الأطفال الذين يعانون من المتلازمة الكلوية بمقارنتهم بالأطفال الأصحاء.
•وجد أن النمط الجينى لتعدد الأنماط الجينيه أحادية النيوكليوتيد لجين مقاومة العديد من الأدوية (T3435C) أكثر حدوثا في الأطفال التي تقل أعمارهم عن 6سنوات بمقارنتهم بالأطفال التي تزيد أعمارهم عن 6 سنوات.
•لا يوجد اختلاف فى النمط الجينى لتعدد الأنماط الجينيه أحادية النيوكليوتيد لجين مقاومة العديد من الأدوية (T3435C) بين الأطفال الذين يستجيبون للعلاج بالاستيرويد والأطفال الذين لا يستجيبون للعلاج بالاستيرويد.
•لا يوجد اختلاف فى النمط الجينى لتعدد الأنماط الجينيه أحادية النيوكليوتيد لجين مقاومة العديد من الأدوية (T3435C) بين عينات الكلى المختلفة (تصلب كبيبات الكلى القطعى البؤري - المتلازمة الكلوية ذات التغير البسيط). 
التوصيات:
•يوصى بإجراء النمط الجيني لتعدد الأنماط الجينيه أحادية النيوكليوتيد لجين مقاومة العديد من الأدوية في التتابعات الأخري مثل ( T1236C-T/A2677G) .
•يوصى بعمل دراسات تحتوى على عدد اكبر من المرضى مع المتابعة لفترة أطول.
•يوصى بعمل دراسات لتقييم وظيفة جليكو بروتين ب في الأنسجة الكلوية .

Idiopathic nephrotic syndrome is the most common glomerular disease in children. It is characterized by remitting and relapsing pattern. Oral steroid treatment is the first line of therapy for childhood nephrotic syndromeAccording to the response to steroid therapy NS patients may be classified as steroid sensitive, steroid resistant, steroid dependent and frequent relapser.
Many efforts have been made to explain the differences in the response to steroid treatment based on the genetic background. Single nucleotide polymorphisms (SNPs) in MDR-1 gene is one of genetic basis that have been reported to have a relation with steroid therapy resistance in children with idiopathic nephrotic syndrome. MDR-1 expression in lymphocytes has been reported to be negatively correlated with the response to prednisone, cyclophosphamide and cyclosporine A in children with NS.
The aim of the study to detect the association of MDR-1 gene polymorphism [C3435T] with susceptibility to childhood nephrotic syndrome and whether it can be used as marker to predict the response to steroids. 
This case control study include 60 children with NS (40 steroid responders and 20 non responders). In addition, there were 20 age and sex matched healthy children who served as control. All participants were subjected to careful history taking, thorough clinical examination and routine laboratory investigations in addition to genetic analysis for MDR-1 polymorphism (C3435T) .
We found that mean of age in steroid responders NS patients was lower than non- responders patients.
As regard to sex, there was no statistically significant difference between steroid responders and non-responder in our results.
Regarding age of onset we found that there was no statistically significant difference between steroid responders and steroid non-responders in our study. 
As regard to systolic and diastolic BP , in our study there was no statistically significant difference between steroid responders and steroid non-responders.
The mean values of proteinuria in 24hs were significantly higher in steroid non-responders NS patients compared to steroid responders.
The mean value of serum albumin was statistically significant higher among steroid responders than steroid non-responders.
When the patients were compared for microscopic hematuria, we found that microscopic hematuria more common in steroid non responders than steroid responders NS patients but this difference was not statistically significant.
Regarding MDR1 C3435T SNP our study showed that, TT genotype and T allele frequencies were statistically significant higher among cases than controls. The higher frequency of the C3435T polymorphism in patients with NS compared to control children indicated that it may be a marker for susceptibility to develop NS. 
On the other hand, we found that no significant difference between steroid responders and steroid non- responders in the distribution of TT genotypes and T allele in MDR-1 C3435T. So that the homozygous mutant genotype of SNP C3435T alone was not associated with the steroid resistant phenotype.
Regarding age of onset we found that, the frequency of TT genotype and T allele of MDR-1 C3435T was statistically significant higher among NS patients with age of onset< 6 years than patients with age of onset > 6 years. 
We found that no statistically significant difference among different histopathological types (MCNS and FSGS), as regard to genotypes and allele distribution of MDR1 C3435T SNP. 
So we concluded that: 
MDR1 C3435T gene polymorphism have a role in susceptibility and earlier onset of NS but not affect the response to steroid therapy and no relation between different histopathological type of NS (MCD and FSGS) and MDR-1 gene polymorphism C3435T.